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有关C18色谱柱的安装步骤,这里有详细说明
发布时间:2020-11-26   点击次数:300次
  C18色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类。多为金属或玻璃制作。有直管形、盘管形、U形管等形状。液相色谱通常均采用填充柱。
  
  C18色谱柱的分离效果取决于所选择的固定相,以及C18色谱柱的制备和操作条件。
  
  色谱是一种分离分析手段,分离是核心,因此担负分离作用的C18色谱柱是色谱系统的心脏。对C18色谱柱的要求是柱效高、选择性好,分析速度快等。市售的用于HPLC的各种微粒填料如多孔硅胶以及以硅胶为基质的键合相、氧化铝、有机聚合物微球、多孔碳等,其粒度一般为3,5,7,10μm等,柱效理论值可达5~16万/米。对于一般的分析只需5000塔板数的柱效;对于同系物分析,只要500即可;对于较难分离物质对则可采用高达2万的柱子,因此一般10~30cm左右的柱长就能满足复杂混合物分析的需要。
  
  柱效受柱内外因素影响,为使C18色谱柱达到zui佳效率,除柱外死体积要小外,还要有合理的柱结构及装填技术。即使*的装填技术,在柱中心部位和沿管壁部位的填充情况总是不一样的,靠近管壁的部位比较疏松,易产生沟流,流速较快,影响冲洗剂的流形,使谱带加宽,这就是管壁效应。这种管壁区大约是从管壁向内算起30倍粒径的厚度。在一般的液相色谱系统中,柱外效应对柱效的影响远远大于管壁效应。
 
  C18色谱柱的安装:
  1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配。为减少死体积,进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线,同时控制进样器、C18色谱柱和检测器之间连接管线的长度。安装C18色谱柱之前,确认流路系统中的溶剂是否正常。对分析较复杂的样品建议安装保护柱。
  2、为了使C18色谱柱与仪器系统达zui佳的连接效果,应尽量使用与C18色谱柱接口相匹配的螺帽和锥形接头,如原来的接头长期匹配其他类型的C18色谱柱,建议在连接新C18色谱柱前应检查匹配情况,避免造成C18色谱柱的损坏或因C18色谱柱不匹配造成的漏液。
  3、使用PEEK 材料的通用接头,只需用手拧紧不需要特定扳手,使用压力为5000psi;使用温度不得超过100℃。
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